SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶(jiāo )电(diàn )泳,即聚丙烯酰胺凝胶电泳(🅰),是生物化学和(🙂)分子生物学实验中常(cháng )用的蛋白质分离和鉴定技术(shù ),这项技术的基本原理是利(lì )用蛋白质在电场中的迁移率(lǜ )与其分子量成(🍤)反比的关系,通过添加阴离子洗(xǐ )涤剂SDS(十(shí )二烷(wán )基硫酸钠)使(shǐ )蛋白质(🕍)带上负电荷,从而消除了蛋白质原有的电荷差异(💽),使得蛋白(bái )质的(de )迁移仅(jǐn )受(🕞)其大小的(de )影响。
操作步骤(zhòu )方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚丙烯酰胺(🚸)凝胶,然(🗿)后(hòu )将含有SDS和还原剂的蛋白质样品(pǐn )加入凝胶(jiāo )孔中,通电后,蛋白质开始根据大(dà )小分(😓)离,小分子(zǐ )蛋(🈺)白质移动得更(🏉)快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色或西方印迹(🌔)等(děng )方法可以检(jiǎn )测和分析蛋白质。
应(yīng )用范围(wéi )广(guǎng )泛,SDS-PAGE不(bú )仅用于(yú )蛋白质分子量的测定,还广泛应用于蛋白质纯化程度的分析(🎠)、蛋(dàn )白质变(biàn )性和复性研(yán )究以及蛋(🤶)白质-蛋白(bái )质相互作用的研究(jiū ),它也是研究蛋白质翻(🐟)译后修(xiū )饰(shì )的(de )重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分析工具(🥏),但它(tā )也有局限性,对于极端大小的(de )蛋(🚾)白质,分辨率可能(🕕)会降(♍)低;某些蛋白(🔌)质可能因为结(jié )构的特(👓)殊(shū )性(♟)而(ér )在凝胶中的迁移不(🐋)(bú )符合预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常需要结(jié )合(hé )其他生化和分(🎬)子生物学技术以获得(👃)更准确的结果。
视频本站于2024-10-24 10:10:34收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。