SDS-PAGE凝(💽)胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电(🦋)泳,即聚丙烯酰(🏪)胺凝胶电(🗂)(diàn )泳,是(🐊)生物化学和分子生物学实验中常(cháng )用的蛋白(bái )质分离和鉴定(dìng )技术,这项技术的基本原(🥖)理是利用蛋白质(💚)在电场(chǎng )中的迁移率与其分子(zǐ )量成(chéng )反比的(👰)关系(xì ),通过添加阴离子洗(xǐ )涤剂SDS(十二烷基硫酸(😉)钠)(📒)使蛋白质带上(shàng )负电(dià(🖲)n )荷,从(cóng )而消除了(〰)蛋白质原有的电(📎)荷差异,使得蛋白质的迁移仅受其大小的影响。
操作步(bù )骤方面,首先需要制备适当浓度(😊)和pH值的聚丙烯酰胺(àn )凝胶,然(rán )后(hòu )将含有(yǒu )SDS和(hé )还原剂的蛋白质样品(pǐn )加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始(shǐ )根据大小分离,小分子蛋白质移动得更快,而大分子蛋白质(zhì )则(zé )较慢,通过(😶)染(🍎)色(🥢)或西(🕡)(xī )方印迹等方法可以检测(cè )和分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用(🎾)于(yú )蛋(〰)白质(🚵)分子量的测定,还广泛应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋白质(zhì(🥄) )变性和复性研(yán )究以及(jí )蛋(🧑)白质-蛋白(bái )质相互作用的(de )研究,它也是研究(jiū )蛋白质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分析工具,但它也有局限性,对于极端大小(xiǎo )的蛋白(bái )质(🐸),分辨率可能会降(jiàng )低;某些(xiē )蛋白质可能因为结构(gòu )的特殊性而在凝胶中(🐿)的迁移不符合预(yù )期,在进(jìn )行(háng )SDS-PAGE分析时,通常需要结合其(qí )他生化和分子生物学(xué )技术以获得更准确的结果(guǒ )。
视频本站于2024-11-07 03:11:08收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。